脂氧素A4(LXA4)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

脂氧素A4(LXA4)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒：

脂氧素A4(LXA4)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒：1.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1～10μg/ml，每孔加0.1ml，4℃過夜；
2.次日洗滌3次；
3.加一定稀釋的待檢樣品（未知抗體）0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時,洗滌；
4.（同時做空白、陰性及陽性孔對照）于反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標第二抗體（抗抗體）0.1ml；
5.37℃孵育35-60分鐘，洗滌；
6.’最后一遍用DDW洗滌。
其余步驟同“雙抗體夾心法"的4、5、6。
發(fā)展前景
臨床測定技術(shù)的發(fā)展主要在于方法學的發(fā)展，而方法學的發(fā)展依托于試劑生產(chǎn)技術(shù)不斷進步更新和型標記物的應(yīng)用。分子生物學正在并最終肯定會讓對整個生命科學有一個全面而*的認識，其對免疫測定技術(shù)發(fā)展的影響也是直接而又有效的，對以前一些難以檢測的生物活性物質(zhì)的測定，并且大大提高了檢測的靈敏度和特異性。
主要設(shè)備
試劑
（1）　包被緩沖液（PH9.60.05M碳酸鹽緩沖液）:
Na2CO3 1.59克
NaHCO3　 2.93克
加蒸餾水至1000ml
（2）　洗滌緩沖液（PH7.4PBS）：0.15M
KH2PO4 　0.2克
Na2HPO4·12H2O　2.9克
NaCl　8.0克
KCl　0.2克
Tween-20　0.05%　0.5ml
加蒸餾水至1000ml
（3）　稀釋液：
牛血清白蛋白（BSA） 0.1克
加洗滌緩沖液至100ml
或以羊血清、兔血清等血清與洗滌液配成5～10%使用。
（4）　終止液（3M　H2SO4）：
蒸餾水178.3ml，逐滴加入濃硫酸（98%）21.7ml。
（5）　底物緩沖液（PH5.0磷酸棗檸檬酸）:
0.2MNa2HPO4（28.4克/L）25.7ml
0.1M檸檬酸（19.2克/L）　 24.3ml
加蒸餾水50ml。
（6）　TMB（四甲基聯(lián)苯胺）使用液:
TMB（10mg/5ml無水乙醇）0.5ml
底物緩沖液（PH5.5）　 10ml
0.75%H2O2　 　32μl
（7）　ABTS使用液:
ABTS　0.5mg
底物緩沖液（PH5.5）　 1ml
3%H2O2　 　2μl
（8）　抗原、抗體和酶標記抗體。
（9）　正常人血清和陽性對照血清。
器材
（1）　聚苯乙烯塑料板（簡稱酶標板）40孔或96孔，ELISA檢測儀，50μl及100μl加樣器，塑料滴頭，小毛巾，洗滌瓶。
（2）　小燒杯、玻璃棒、試管、吸管和量筒等。
（3）　4℃冰箱，37℃孵育箱。