一文看懂兔溶菌酶檢測試劑盒的檢測步驟

　　兔溶菌酶檢測試劑盒檢測目的：用于測定血清，血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標本。

　　試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。往預(yù)先包被人心型脂肪酸結(jié)合蛋白（h-FABP）捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成*終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人心型脂肪酸結(jié)合蛋白（h-FABP）呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），計算樣品濃度。

　　兔溶菌酶檢測試劑盒的檢測步驟：

　　1、準備工作：將試劑、標準品和樣品等達到室溫，并確保所有試劑和設(shè)備準備就緒。

　　2、樣品處理：將待測樣品和標準品加入預(yù)先涂有捕獲抗體的酶標板孔中，使活化素與捕獲抗體結(jié)合。

　　3、洗滌：通過洗滌步驟去除未結(jié)合的物質(zhì)，以減少非特異性信號。

　　4、檢測抗體結(jié)合：加入標記有酶的檢測抗體，使其與已結(jié)合的活化素形成復(fù)合物。

　　5、再次洗滌：去除未結(jié)合的檢測抗體。

　　6、顯色反應(yīng)：加入顯色底物，使酶催化底物反應(yīng)產(chǎn)生可測量的顏色。

　　7、反應(yīng)終止：通過加入反應(yīng)終止劑，停止顯色反應(yīng)。

　　8、測量信號：使用光度計測量吸光度，根據(jù)標準曲線確定樣品中活化素的濃度。

　　兔溶菌酶檢測試劑盒的原理基于活化素與特異性抗體的結(jié)合，并利用酶的催化作用產(chǎn)生可測量的信號。通過比較待測樣品的信號與標準曲線上的標準品信號，可以確定樣品中活化素的濃度。具體的操作步驟和原理可能因不同的試劑盒品牌和制造商而有所不同，因此，在使用兔溶菌酶檢測試劑盒之前，建議仔細閱讀試劑盒的說明書和制造商提供的指南，并遵循其建議和要求。